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1.儀器的分類(lèi)

紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)按使用波長(zhǎng)范圍可分為可見(jiàn)分光光度計(jì)和紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)兩類(lèi)（統(tǒng)稱(chēng)為分光光度計(jì)）。前者的使用波長(zhǎng)范圍是400～780nm；后者的使用波長(zhǎng)范圍為200～1000nm可見(jiàn)，分光光度計(jì)只能用于測(cè)量有色溶液的吸光度，而紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)可測(cè)量在紫外、可見(jiàn)及近紅外光區(qū)有吸收的物質(zhì)的吸光。紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)按光路可分為單光束和雙光束兩類(lèi)。單光束分光光度計(jì)是:光源發(fā)出的光經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過(guò)參比溶液和樣品溶液，以進(jìn)行吸光度測(cè)定。這種簡(jiǎn)易型儀器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，操作方便，適用于常規(guī)分析。雙光束分光光度計(jì)有二類(lèi)，一是光源發(fā)出的光由單色器分光后，經(jīng)反射鏡分解為強(qiáng)度相等的兩束光，一束通過(guò)參比池，另一束通過(guò)樣品池。光度計(jì)能自動(dòng)比較兩束光的強(qiáng)度，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對(duì)數(shù)變換將它轉(zhuǎn)換成吸光度，并作為波長(zhǎng)的函數(shù)記錄下來(lái)。此類(lèi)儀器一般都能自動(dòng)記錄吸收光譜曲線。由于兩光束同時(shí)分別通過(guò)參比池和樣品池，還能自動(dòng)消除光源強(qiáng)度變化所引起的誤差。二是光源發(fā)出的光由單色器分光后被分成兩束，一束直接到達(dá)檢測(cè)器另一束通過(guò)樣品后到達(dá)另一檢測(cè)器。這種儀器稱(chēng)為比例雙光束分光光度計(jì)，它的優(yōu)點(diǎn)是可以監(jiān)測(cè)光源變化帶來(lái)的誤差，但并不能消除參比造成的影響。

2.儀器的基本組成部分

目前，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的型號(hào)較多，但它們的基本結(jié)構(gòu)都相似，都由光源、單色器、樣品吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)顯示系統(tǒng)五大部件組成，其組成框圖見(jiàn)下圖

光源→

單色器→

吸收池→

檢測(cè)器→

信號(hào)顯示系統(tǒng)

紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)組成部件框圖

由光源發(fā)出的光，經(jīng)單色器獲得一定波長(zhǎng)單色光照射到樣品溶液，被吸收后，經(jīng)檢測(cè)器將光強(qiáng)度變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)變化，并經(jīng)信號(hào)指示系統(tǒng)調(diào)制放大后，顯示或打印出吸光度A（或透射比τ），完成測(cè)定。

（1）光源 

光源是提供入射光的裝置。對(duì)光源要求是:在所需完的光譜區(qū)域內(nèi)，發(fā)射連續(xù)的具有足夠強(qiáng)度和穩(wěn)定的紫外及可見(jiàn)光。并且輻射強(qiáng)度隨波長(zhǎng)的變化盡可能小，使用壽命長(zhǎng)。可見(jiàn)光區(qū)常用的光源為鎢燈和碘鎢燈，其波長(zhǎng)范圍為350～1000nm；紫外光區(qū)常用的光源為氫燈或氘燈，其中氘燈的輻射強(qiáng)度大，穩(wěn)定性好，壽命長(zhǎng)，因此近年生產(chǎn)的儀器多使用氘燈，氫燈和氘燈發(fā)射的連續(xù)光譜波長(zhǎng)范圍為180～360nm。

（2）單色器

單色器是能從光源輻射的復(fù)合光中分出單色光的光學(xué)裝置。單色器一般由入射狹縫、準(zhǔn)光器（透鏡或凹面反射鏡使入射光成平行光）、色散元件、聚集元件和出射狹縫等幾部分組成。其核心部分是色散元件，起著分光的作用。*常用的色散元件是棱鏡和光柵光柵是利用光的衍射與干涉作用制成的，它可用于紫外、可見(jiàn)及紅外光域，而且在整個(gè)波長(zhǎng)區(qū)具有良好的、幾乎均勻一致的分辨能力，現(xiàn)在儀器多使用它。

入射、出射狹縫、透鏡及準(zhǔn)光鏡等光學(xué)元件中狹縫在決定單色器性能上起重要作用。狹縫大會(huì)影響單色光的純度，但過(guò)小的狹縫又減弱入射光強(qiáng)。

（3）吸收池

吸收池是用于盛裝被測(cè)量溶液的裝置。一般可見(jiàn)光區(qū)使用玻璃吸收池，紫外光區(qū)使用石英吸收池。紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)常用的吸收池規(guī)格有0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等，使用時(shí)，根據(jù)實(shí)際需要選擇。

（4）檢測(cè)器

檢測(cè)器是將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置。常用的檢測(cè)器有硒光電池、光電管、光電倍增管和光電二極管陣列檢測(cè)器。硒光電池結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，價(jià)格便宜，但長(zhǎng)時(shí)間曝光易“疲勞”，靈敏度也不高；光電管的靈敏度比硒光電池高；光電倍增管不僅靈敏度比普通光電管靈敏，而且響應(yīng)速度快，是目前高、中檔分光光度計(jì)中*常用的一種檢測(cè)器；光電二極管陣列檢測(cè)器是紫外可見(jiàn)光度檢測(cè)器的一個(gè)重要進(jìn)展，它具有極快的掃描速度，可得到三維光譜圖。

（5）信號(hào)顯示器

信號(hào)顯示器是將檢測(cè)器輸出的信號(hào)放大并顯示出來(lái)的裝置。常用的裝置有電表指示、圖表指示及數(shù)字顯示等現(xiàn)在絕大多數(shù)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)都裝有微處理機(jī)，一方面將信號(hào)記錄和處理，另一方面可對(duì)分光光度計(jì)進(jìn)行操作控制。